HiScript II One Step RT-PCR Kit

P611/P612 (Dye Plus)
　
      
PN Product Name Size Price (TWD)
P611-01 HiScript II One Step 50 rxn (50ul/rxn) 5,775
P612-01 HiScript II One Step(Dye Plus) 50 rxn (50ul/rxn) 5,775
 
a. 包含dNTP。
b. 包含RNase inhibitor、HiScript II Reverse Transcriptase、以及Champagne Taq plus DNA Polymerase。
a. 包含dNTP、甘油及染料
b. 包含RNase inhibitor

   優勢   
• 逆轉錄和PCR 在同一管內進行
• 檢測靈敏度可達0.1 pg 總RNA
• 可擴增超過10 kb 的長片段

   說明   
本試劑盒專為以RNA 為範本( 如RNA 病毒) 的終點法PCR 檢測而設計。使用基因特異引物(GSP)，逆轉錄和PCR 反應在一管內完成，不需要額外的開管/ 移液操作，大大提高了檢測通量，並降低了污染的風險。整合HiScript II Reverse Transcriptase以及Champagne TaqTM DNA Polymerase 的優越性能，配合經過優化的緩衝體系，HiScript II One Step RT-PCR Kit 可擴增片段長達10 kb 以上。試劑盒以便捷的Master Mix 形式提供。2 × One Step Mix 包含優化的緩衝體系和dNTPs；One Step Enzyme Mix 包含比例優化的HiScript II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor 以及Champagne TaqTM DNA Polymerase，操作簡單快捷。

   實驗範例    
A. 以Hela細胞總RNA為範本，用HiScript II One Step RT-PCR Kit (P611) 擴增555 bp GAPDH片段。檢測靈敏度可達到0.1 pg。
B. 以豬藍耳病毒PRRSV RNA為範本，用HiScript II One Step RT-PCR Kit (P611) 擴增660 bp片段。檢測靈敏度可達到0.2 TCLD50。
C. 以1 μg Hela細胞總RNA為範本，用HiScript II One Step RT-PCR Kit (P611)擴增不同長度的片段。可成功擴增長達12.1 kb的UTRN片段。

  簡易流程  

步驟1. 去除gDNA 殘留汙染
Items uL Conc./Amount
ddH2O 16-4-X ----
4X gDNA Wiper 4 1X
Template RNA X 1pg~1ug
Step 1 Total 16  
         pipetting 混勻後 (不要vortex)
         incubate at 42℃ for 2 min. 去除gDNA 殘留汙染
Temp Time
42°C 2 min
 
 
步驟 2   加入RT 預混液 
pipetting 混勻後
Items uL Conc./Amount
Step 1 Total 16 ----
5X HiScript II qRT
SuperMix II		 4 1X
Final Total 20  
        pipetting 混勻後 (不要vortex)
 
步驟 3  反轉錄反應
Temp Time
50°C 15 min
85°C 2 min

   文獻發表   

• Pang J, Wu Y, Li Z, et al. (2016). Targeting of the human F8 at the multicopyrDNA locus in Hemophiliaa patient-derived iPSCs using TALENickases.Biochemical and Biophysical Research Communications, 472(1):144-149. IF:2.297

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