BCA Protein Quantification Kit
E112
| PN | Product Name | Size | Price (TWD) |
| E112-01 | BCA Protein Quantification Kit | 250rxn | 3,780 |
| E112-02 | BCA Protein Quantification Kit | 500rxn | 5,880 |
操作簡單
高靈敏度
兼容性廣
線性關係高的標準曲線
BCA 蛋白濃度測定試劑盒（BCA Protein Quantification Kit），是目前靈敏度最高的蛋白質測定方法之一。在鹼性條件下，蛋白質將Cu 2+還原為Cu +，Cu + 與獨特的BCA Reagent A（含有BCA）相互作用產生敏感的顏色反應，形成紫色的絡合物。該水溶性的複合物在A562 nm 處顯示強烈的吸光性，吸光度和蛋白質濃度在廣泛範圍內有良好的線性關係，根據吸光值可以推算出蛋白濃度。因此，使用酶標儀測定其在A562 nm 處的吸收值，並與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。
常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween-20等不影響檢測結果， 但受螯合劑(EDTA，EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實驗中，若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可使用Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。
實驗案例
F&Q
Q1：樣本濃度不在標曲範圍內，該怎麼操作？
A1：如果樣本濃度太高，需要預先做稀釋，最好是通過預實驗確定樣本稀釋範圍。
Q2：標曲R 2不符合要求是什麼原因？
A2：主要是加樣量不准確導致的誤差，建議校正排槍，注意加樣準確度。另外在進行分析時，可以去掉1-2個偏差較大的點，重新計算標曲。
Q3：BCA使用注意事項。
A3：
（1）需96孔酶標板，酶標儀一台，測定波長為A562 nm最佳。也可以使用分光光度計測定，但測定時，需根據比色皿的最小檢測體積，適當加大BCA工作液的使用量使不小於最小檢測體積，樣品和標準品的用量可相應按比例放大也可不變。使用分光光度計測定蛋白濃度時， 每個試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著減少；
（2）長期不用時，Reagent A/B可置於2-8℃保存，如發現細菌污染則應丟棄。Reagent A試劑在低溫條件下出現結晶沉澱時，可37℃孵育使其完全溶解, 不影響使用；
（3）如發現樣品稀釋液或裂解液本身就有較高背景，請使用諾唯贊生產的Bradford蛋白濃度測定試劑盒；
（4）進行BSA標準蛋白標準曲線繪製時，使用樣品蛋白的溶解液溶解BSA最優；
（5）BCA試劑對去污劑不敏感，可兼容SDS 3%、Tween-20 5%、EDTA 15 mM、無EGTA、Triton X-100 5%；對還原劑比較敏感，可兼容DTT 0.5 mM、β-巰基乙醇0.07%；
（6）BCA工作液配製過程中吸取Reagent A液和Reagent B液務必更換吸頭，工作液新鮮配製後應立即使用，長時間放置會影響檢測靈敏度；
（7）最好使用塑料比色皿，如使用玻璃比色皿或石英比色皿，使用後立即用少量95%的乙醇清洗。
（8）為了安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。
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