VAHTS Blood Collection Tube for cell-free DNA Preservation 10ml/tube
N901
優勢
| PN | Product Name | Size | Price (TWD) |
| N901 | VAHTS Blood Collection Tube for cell-free DNA Preservation 10ml/tube |
100 Tubes | - |
• 穩定室溫保存全血內游離DNA長達14天，無基因組DNA釋放及DNA酶引起的降解
• 良好的溫度/振盪耐受性，便於血樣的儲存及長途運輸
• 提取得到的游離DNA具有優良的建庫效率及文庫可信度
• 人性化的標籤設計容易使用和減少樣品處理錯誤
• 良好的溫度/振盪耐受性，便於血樣的儲存及長途運輸
• 提取得到的游離DNA具有優良的建庫效率及文庫可信度
• 人性化的標籤設計容易使用和減少樣品處理錯誤
說明
血漿游離DNA（Cell-free DNA）作為無創產前診斷和腫瘤診斷的重要檢測樣本，其作用和重要性正日益顯現。在未經處理的血漿中，cfDNA很容易受到核酸酶的降解，同時血漿中白細胞死亡產生的大量的基因組DNA也會嚴重干擾下游應用，所以用於cfDNA提取的全血保存時間通常不能超過12小時，極大限制了cfDNA在臨床診斷中的應用。VAHTS游離DNA保存用採血管，專門用於長時間穩定保存全血中游離DNA的血液採集保存管。本產品中含有對人體無毒的無游離醛基保護劑，可有效維持血漿中白細胞的完整性，避免基因組DNA的釋放，同時產品中的核酸酶抑製成分保證游離DNA不被降解，從而達到長時穩定保存血液游離DNA的目的。使用本產品純化的血液可保證游離DNA常溫穩定儲存14天，同時在4~30℃的溫度範圍內可承受連續振盪24小時，極大的方便了樣品的儲存和運輸。
圖1：實際抽取血液後之結果，可見分層清楚且無溶血狀況。
更穩定的血漿游離DNA保存
用VAHTS cfDNA 保存管的血樣在室溫保存7天及14天後使VAHTS serum/plasma circulating DNA Kit（N902-01）磁珠法純化血漿cfDNA，均可得到高產量、不受細胞基因組（gDNA）干擾的高質量cfDNA。下圖顯示保存7天的cfDNA經Agilent 2100高敏晶片檢測得到的DNA 分佈圖，cfDNA峰形飽滿集中，無降解基因組DNA干擾。而某國產cfDNA 保存管保存血漿在7天時已有大量基因組降解。使用美國S公司cfDNA採血管（S）和日本T公司cfDNA 採血管（T）及VAHTS cfDNA採血管（V）對同一成人抽取外周血平行比較，7天和14天室溫條件下V採血管cfDNA含量穩定，無gDNA 釋放。7 天、10 天、14 天cfDNA產量比較，S採血管增加的部分為基因組釋放產生的干擾。
同時，VAHTS cfDNA採血管能有效抑制血漿DNA 降解。在VAHTS cfDNA採血管保存全血中加入等量外源DNA短片段，7天和14天後純化cfDNA檢測外源DNA相對於投入量的降解情況，如下圖所示，與競品相比VAHTS cfDNA採血管能夠極大程度地保存DNA不被血液中DNA酶降解。
圖1. VAHTS 採血管保存7天分離cfDNA
用VAHTS cfDNA 保存管的血樣在室溫保存7天及14天後使VAHTS serum/plasma circulating DNA Kit（N902-01）磁珠法純化血漿cfDNA，均可得到高產量、不受細胞基因組（gDNA）干擾的高質量cfDNA。下圖顯示保存7天的cfDNA經Agilent 2100高敏晶片檢測得到的DNA 分佈圖，cfDNA峰形飽滿集中，無降解基因組DNA干擾。而某國產cfDNA 保存管保存血漿在7天時已有大量基因組降解。使用美國S公司cfDNA採血管（S）和日本T公司cfDNA 採血管（T）及VAHTS cfDNA採血管（V）對同一成人抽取外周血平行比較，7天和14天室溫條件下V採血管cfDNA含量穩定，無gDNA 釋放。7 天、10 天、14 天cfDNA產量比較，S採血管增加的部分為基因組釋放產生的干擾。
同時，VAHTS cfDNA採血管能有效抑制血漿DNA 降解。在VAHTS cfDNA採血管保存全血中加入等量外源DNA短片段，7天和14天後純化cfDNA檢測外源DNA相對於投入量的降解情況，如下圖所示，與競品相比VAHTS cfDNA採血管能夠極大程度地保存DNA不被血液中DNA酶降解。
圖1. VAHTS 採血管保存7天分離cfDNA
圖2. 其他廠牌採血管保存7天分離cfDNA
圖3. 保存7天後分離cfDNA質量比較
圖4. 保存14天後分離cfDNA質量比較
圖5. 7 天、10 天、14 天cfDNA 產量比較
更強的溫度/振盪耐受性
使用S公司cfDNA採血管（S）和VAHTS cfDNA採血管（V）對同一成人抽取外周血平行比較，37 ℃條件下保存7天或室溫150 rpm振盪24小時後進行cfDNA提取和2100高敏檢測。結果如下。
圖6. 37℃加壓7 天分離cfDNA
圖7. 150rpm振盪24h分離cfDNA
實驗結果表明溫度加壓和振盪條件下V採血管有更好的抗基因組釋放能力。
更強抗DNA降解能力
在VAHTS cfDNA採血管保存全血中加入等量150 bp外源DNA片段，經過7天或14天後提取cfDNA檢測外源DNA相對於投入量的降解情況，如下圖所示，與竟品相比VAHTS cfDNA採血管能夠極大程度地保存DNA不被血液中DNA酶降解。
圖8. 外源DNA 經7 天、14 天相對投入量比較
更高效建庫效率
以上cfDNA經過VAHTS Universal DNA Library Prep Kit for Illumina V2（ND606）建庫（來源於100 μl血漿的500 pg起始量DNA、擴增15個循環）後使用Agilent 2100的DNA1000晶片檢測結果如下圖。文庫產出穩定，沒有基因組降解干擾，與進口cfDNA採血管平行比較，文庫產量穩定，可以建立高質量基因文庫。
圖9. 低起始量cfDNA建庫質量比較
更高的文庫可信度，來自於最少的基因組污染
使用VAHTS cfDNA採血管保存孕齡13周孕婦外周血7天及14天後分離cfDNA，2 ng 起始量建庫，PCR 13個循環，Hiseq X-10 PE150定序3.5G，雙端分析R1/R2各50bp評價常染色體數均在正常值範圍內，與抽血後即時分離得到的cfDNA建庫定序結果完全一致，重複性良好。
1. 樣品採集後，6~37℃下可以穩定14天 。
(若放在冰箱中 溫度不要低於4℃避免冰晶形成 破壞 WBC細胞膜 釋出 WBC DNA )
2. 血漿取出後，即可進入純化DNA動作。
3. 血球同一般處理方式即可。
4. 參考下圖旋轉方式 不要劇烈搖晃 充分均勻混和即可。
5. 使用冰袋運輸時，應避免採血管與冰袋直接接觸，會導致血液被冰凍起來，若再次解凍後會有嚴重溶血現象。
6. 若要確認是否有溶血現象，可由第二次速離心完畢後進行判斷。
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