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轉錄組_長鏈非編碼RNA定序 (LncRNA-seq)

 
Lnc RNA Sequencing
 
 Lnc RNA分析服務
統計分析 1000 / sample
*2組以上 多組比較(>20) 3000 / group
*客製化需求
 
 
 
        長鏈非編碼RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)是一類長度大於200 nt且不表現出蛋白質編碼潛能的RNA,參與了X染色體沉默,基因組印記以及染色質修飾,轉錄激活,轉錄干擾,核內運輸等多種重要的調控過程,涉及到表觀遺傳調控、轉錄調控以及轉錄後調控等多個層面。LncRNA測序使用特定方法(如採用Ribo-Off系列Kit)降低樣本中rRNA的豐度,對富集到的RNA進行文庫構建,然後,利用高通量定序產出的數據進行信息分析,能夠快速全面、準確地獲得與特定生物學過程(例如發育、疾病等)相關lncRNA的信息。

  技術優勢  

●   重複性好:同一樣本重複建庫相關性pearson值大於0.993
●   序列完整:基於高通量定序技術,能夠一次性獲得樣本中幾乎全部的lncRNA信息
●   分析嚴謹:不侷限於對已知lncRNA的研究,還能夠進行新lncRNA預測
●   物種多元:能夠對包括人類、動植物在內的許多物種的lncRNA進行分析和預測
●   關聯全面:能夠結合mRNA以及small RNA數據,進行多方位的調控關聯分析

 
  技術流程  
 
     

  生物訊息分析  

標準訊息分析
--定序數據質控

--rRNA比對分析
--基因組比對分析
--樣品lncRNA預測
--樣品轉錄本覆蓋統計分析
--表達量分析
--差異基因篩選
--組間差異基因篩選
--表達模式聚類分析
--基於鹼基配對的lncRNA-mRNA互作分析
--基因上下游lncRNA的註釋
--miRNA前體預測
--lncRNA家族預測
 

進階訊息分析(需要有mRNA以及smallRNA分析結果)
mRNA,smallRNA和LncRNA聯合分析

 
  報告內容範例  
 



  實驗範例  
LncRNAs和增強子RNAs在人單核白細胞中調控脂多糖引起的炎症反應
早期報告表明lncRNAs是生物反應的新的調控因子。然而,它們在最初防禦感染的人先天免疫反應中作用還不是很清楚。該研究利用RNA測序技術對人主要單核細胞的lncRNA進行了描述,發現76個增強子RNAs(eRNAs,enhancer RNAs),40個常規lncRNAs,65個反義lncRNAs和35個雙向轉錄區域(RBT,regions of bidirectional transcription)在對於細菌脂多糖(LPS,lipopolysaccharide)的反應中差異表達(圖1)。至關重要的是,該研究證明敲掉IL1b基因座周圍的nuclear-localized,NF-κB-regulated,eRNAs(IL-1b-eRNA)和RBT(IL-1b-RBT46)後,LPS引起的mRNA轉錄以及促炎介質,IL-1b和CXCL8的釋放會轉弱。該研究預測lncRNAs是人先天免疫反應的重要調控因子。

 圖1:lncRNA預測流程以及人單核白細胞中LPS對於lncRNA表達的調節

參考文獻
Nicholas E. IIltt, James A. Heward, et al. Long non-coding RNAs and enhancer RNAs regulate the lipopolysaccharide-induced inflammatory response in human monocytes. Nature Communications (2014)5:3979
 
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