miRNA Expression qPCR Analysis

  說明   

•  microRNA為19-22nt的短的非编碼RNA。
•  與mRNA的3'-UTR區域結合，進而在轉錄後調控mRNA的表達。
•  在不同物種中，miRNA 序列具有高度的保守性 ( Conserved )，具有組織特異性。
•  microRNA的表達改變與目前各種已知疾病相關。

  原理  

●  採用廣泛認可的Stem-loop法，其包含miRNA特異的反轉錄引物，以及qPCR正、反向引子。環狀結構的miRNA特異反轉錄引物可特異性的轉錄mature miRNA。再利用高度特異的正反向引子，使miRNA定量既靈敏又具高度特異。
●  提供miRNA spike-in，以監控miRNA純化過程是否有較大損失和反轉錄與定量PCR是否有PCR抑制劑。




  實驗範例   
miRNA檢測範例



圖1. qPCR檢測MCF Cell 中miRNA-21-5p的表達情況